紫外分光光度計(jì)雖好用，但操作稍有疏忽就會(huì)出錯(cuò)，比如數(shù)據(jù)忽高忽低、結(jié)果和預(yù)期差太多。其實(shí)很多問題都是可以提前避免的，這篇新手避坑指南請收好。
第一個(gè)坑是“樣品準(zhǔn)備不規(guī)范"。樣品必須澄清透明，要是有沉淀或渾濁，光穿過時(shí)就會(huì)被“阻擋"，不是被分子吸收，而是被顆粒反射，這樣測出來的吸光度肯定不準(zhǔn)。所以測之前一定要過濾或離心，去掉雜質(zhì)。另外，樣品濃度也不能濃度太高，光幾乎穿不過去，吸光度會(huì)“爆表"；濃度太低，信號(hào)太弱，誤差會(huì)很大。一般建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，把濃度調(diào)整到儀器的最佳檢測范圍。
第二個(gè)坑是“比色皿使用不當(dāng)"。比色皿是裝樣品的透明容器，分石英和玻璃兩種，這倆可不能混用。玻璃會(huì)吸收紫外光，所以測紫外波長（200-400nm）時(shí)必須用石英比色皿；測可見光（400-760nm）時(shí)，石英和玻璃都能用。而且比色皿的“光面"和“毛面"要分清——光會(huì)從光面穿過，毛面是用來拿的，要是不小心用手碰了光面，指紋和油脂會(huì)吸收光，影響數(shù)據(jù)。用完后一定要用蒸餾水沖洗干凈，倒扣晾干，避免殘留樣品腐蝕器皿。
第三個(gè)坑是“空白對照沒做好"。空白對照就是“不含待測物質(zhì)的溶劑"，比如測水溶液樣品時(shí)，空白就是蒸餾水。測樣品前必須先測空白，讓儀器“記住"溶劑的吸收情況，這樣才能扣除溶劑的影響，只算出樣品本身的吸光度。要是跳過空白步驟，溶劑里的雜質(zhì)或微量污染物就會(huì)被當(dāng)成樣品信號(hào)，導(dǎo)致結(jié)果偏高。
最后提醒一句，開機(jī)后要讓儀器預(yù)熱30分鐘左右，待光源和檢測器穩(wěn)定后再測，不然數(shù)據(jù)會(huì)漂移。只要做好這幾點(diǎn)，新手也能測出穩(wěn)定可靠的結(jié)果。
