可見分光光度計操作步驟詳解

可見分光光度計是基于物質對特定波長可見光的吸收特性進行分析的常用儀器，廣泛應用于教學、常規檢測與科研實驗等領域。本文將系統介紹其操作流程，幫助使用者規范操作、獲取可靠數據。

一、操作前準備

儀器檢查與開機

確認儀器處于平穩臺面，接通電源。打開主機電源開關，系統自檢后進入主界面。預熱時間一般建議為15-30分鐘，使光源穩定、檢測系統達到平衡狀態。

樣品與試劑準備

根據測定標準（如GB/T261）準備樣品與標準溶液。使用匹配的比色皿，裝入參比溶液（通常為空白溶劑）與待測樣品液。注入液體量適中，外壁需用擦鏡紙拭干，避免留下指紋或水漬影響透光。

二、基礎測定：光度測量

參數設置

在儀器主界面選擇“光度測量"模式。設定測定波長，可通過數字鍵盤直接輸入或從列表中選擇。部分儀器支持多波長同時測定，可根據需要添加多個波長點。

基線校準

將裝有參比溶液的比色皿放入樣品室，關閉蓋子。執行“調零"或“基線校正"操作，儀器將自動調整透光率為100%（吸光度為0）。此步驟可消除溶劑與比色皿本身的光吸收影響。

樣品測定

取出參比皿，放入樣品皿。點擊“測量"鍵，儀器顯示該波長下樣品的吸光度（A）、透光率（%T）及能量值。記錄數據或直接保存至儀器存儲器。

三、定量分析：建立標準曲線

標準溶液測定

在“定量測試"模式下，選擇標準曲線法（如多點線性擬合）。依次測量一系列已知濃度的標準溶液，儀器自動記錄各濃度對應的吸光度值。

曲線擬合與驗證

測定完成后，儀器可繪制濃度-吸光度曲線，并給出擬合公式與相關系數。建議使用相關系數評估線性關系。可測定1-2個驗證樣品檢驗曲線可靠性。

未知樣濃度計算

將未知樣品按相同條件處理并測定吸光度，儀器依據標準曲線自動計算并顯示濃度結果。

四、進階功能應用

光譜掃描

用于獲取樣品在一定波長范圍內的吸收光譜。進入“波長掃描"功能，設置起始波長、結束波長及掃描速度。

若需監測反應過程中吸光度隨時間的變化，可選擇“時間掃描"。設定監測波長、時間區間與取樣間隔，啟動后儀器自動跟蹤記錄，可用于反應速率計算。

五、數據保存與儀器維護

數據導出

測定結果可儲存于儀器內置存儲器，也可通過數據接口連接電腦導出。部分型號支持微型打印機直接打印報告。

結束操作

測量完成后，取出比色皿并清洗干凈。關閉儀器電源，填寫使用記錄。定期清潔樣品室，避免灰塵或液體殘留影響光學系統。

注意事項：

比色皿需保持透光面清潔，避免劃傷。

溶液不可長時間放置于樣品室，防止揮發或腐蝕。

若儀器長期不用，建議定期通電維護。

規范的操作流程是保證分光光度計測量準確性與重復性的基礎。使用者應結合具體實驗要求合理選擇功能，并嚴格遵守相應標準方法進行操作。